親和層析柱1 mL二：細(xì)胞裂解5. 如果用本產(chǎn)品 A 型，用 1 mL 冰浴的新鮮配制的細(xì)胞裂解液（1 mL 1×PBS 緩沖液+50 uL 溶液 A+ 25 uL 10 mg/mL 的 PMSF 溶液）重懸細(xì)菌沉淀，冰上超聲裂解菌體直到在顯微鏡下看見絕大多數(shù)細(xì)胞破裂。超聲參數(shù)需根據(jù)儀器型號自行摸索，一般選 1K-10K 頻率處理 15 次，每次20 秒，間隔 1 分鐘（必需放置在冰上）。裂解物不能粘稠，否則會堵塞層析柱。6. 如果用本產(chǎn)品 B 型，在 1 mL 冰浴的新鮮配制的細(xì)胞裂解液（在 20 mL1×PBS 緩沖液中加入所有 30 mg 溶菌酶干粉，溶解后分裝成 1 mL/管，取一管使用，剩余的-20℃放置）中加入 25 uL 10 mg/mL 的 PMSF 溶液和 1 uL Benzonase，用此混合液重懸細(xì)菌沉淀后冰上放置 30 分鐘，得到細(xì)菌裂解物。7. 將超聲或酶法細(xì)胞裂解物在 13000 g 4℃離心 10 分鐘去除未裂解細(xì)胞和裂解細(xì)胞碎片以防堵柱，所得上清即含可溶性 GST 標(biāo)記蛋白。三：層析柱的制備和 GST 蛋白純化8. 搖晃將谷胱甘肽-Agarose 介質(zhì)充分混勻后，取適量加入到預(yù)放了一片篩板的層析柱中（介質(zhì)用量需要根據(jù) GST 蛋白產(chǎn)量決定，100 mL 菌液一般使用 200 uL 介質(zhì)即可）。下列步驟各溶液的用量均針對 200 uL 介質(zhì)而定，如果介質(zhì)用量不同，各溶液用量需相應(yīng)調(diào)整。9. 用 5 mL 預(yù)冷的 1×PBS 緩沖液洗柱。10.將第 7 步得到的上清液（含可溶性 GST 標(biāo)記蛋白）上柱，讓重力使上柱液自然流出，收集并保存穿透液用于 SDS-PAGE 電泳。GST 和谷胱甘肽之間的結(jié)合很緩慢，所以流速一定不能快，否則結(jié)合不充分。流速一般在 0.2-1 mL/分鐘即可。如要提高 GST 標(biāo)記蛋白與介質(zhì)的結(jié)合效率，可用本試劑盒提供的紅蓋將層析柱下的漏液口堵上，讓細(xì)菌裂解液和介質(zhì)在4℃結(jié)合 30 分鐘或過夜。也可以將穿透液反復(fù)上柱。11.用 0.5-2 mL 1×PBS 緩沖液洗柱，收集并保存穿透液（含雜蛋白）。12.用 0.2-1 mL GST 洗脫液洗柱，收集并保存穿透液（含 GST 標(biāo)記蛋白）。由于可能含蛋白酶污染，所以穿透液不能在 4℃放置，需立即用于后續(xù)處理（如濃度測定或 SDS-PAGE 電泳）或-80℃長期放置。13.對收集的 2 種穿透液和洗脫液進(jìn)行蛋白定量或 SDS-PAGE 分析。注意：如果不預(yù)先脫鹽，則只能用 Bradford 法或 OD 檢測法（1 OD280 約等于 0.5 mg/mL 蛋白）測定穿透液和洗脫液的蛋白濃度。由于 GST 的分子量為 26 KD，所以在 SDS-PAGE 膠上，GST 標(biāo)記蛋白將比天然蛋白大 26 KD。親和層析柱1 mL原理及特點(diǎn):重組蛋白 N 端的 GST 谷胱甘肽 S 轉(zhuǎn)移酶（Glutathione S Transferase）能提高重組蛋白的水溶性，所以常用于蛋白質(zhì)重組表達(dá)。GST-谷胱甘肽親和層析是利用 GST 標(biāo)記的蛋白能與谷胱甘肽層析介質(zhì)結(jié)合，并能被還原型谷胱甘肽洗脫的特點(diǎn)而建立，是目前分離純化 GST 標(biāo)記蛋白質(zhì)的重要方法。本產(chǎn)品就是專門用于上述目的，具有下列特點(diǎn)：1. 一站式套裝，含所需的谷胱甘肽介質(zhì)、溶液和層析柱，用戶只需要提供表達(dá) GST 標(biāo)記蛋白的細(xì)菌（酵母、桿狀病毒、培養(yǎng)細(xì)胞）即可，非常方便。2. 專一性強(qiáng)，一次過柱即可獲得純度高達(dá) 95%的 GST-標(biāo)記蛋白。3. 只能在非變性條件下使用，只可用于純化沒形成包涵體的 GST 標(biāo)記蛋白。4. 每次可以處理 20 mL 的表達(dá)菌液，適合初步篩選和鑒定。5. 提供 4 mL 濃度為 50%的谷胱甘肽-Agarose 介質(zhì)，可吸附 5-10 mgGST 標(biāo)記蛋白質(zhì)。6. 本介質(zhì)可以反復(fù)使用多次。一:重組蛋白的表達(dá)和細(xì)菌收集1. 37℃振蕩培養(yǎng) 20 mL 含表達(dá)質(zhì)粒的細(xì)菌到 OD600=0.6-0.8。2. 加 IPTG 到終濃度為 0.1 mM，30℃振蕩培養(yǎng) 3 小時(shí)或 22℃振蕩培養(yǎng) 8小時(shí)（或過夜）。3. 4℃ 5000 g 離心 10 分鐘收集 20 mL 表達(dá)菌液，棄上清。4. 用 1×PBS 緩沖液重懸細(xì)菌沉淀，4℃ 5000 g 離心 10 分鐘，棄上清。沉淀可直接用于裂解或放-80℃保存。

小鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)elisa試劑盒，英文名：Tn-Ⅰ ELISA Kit

小鼠肌鈣蛋白Ⅰ(cTnⅠ)ELISA試劑盒，英文名：cTnⅠ ELISA Kit

小鼠饑餓激素(GHRL)ELISA試劑盒，英文名：GHRL ELISA Kit

小鼠活性氧(ROS)ELISA試劑盒，英文名：ROS ELISA Kit

小鼠活化素B(ACV-B)ELISA試劑盒，英文名：ACV-B ELISA Kit

小鼠活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒，英文名：ACV-A ELISA Kit

小鼠活化蛋白C(APC)ELISA試劑盒，英文名：APC ELISA Kit

小鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)ELISA試劑盒，英文名：LHRH ELISA Kit

小鼠黃體生成素(LH)ELISA試劑盒，英文名：LH ELISA Kit

小鼠環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒，英文名：cAMP ELISA Kit

小鼠環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒，英文名：cGMP ELISA Kit

小鼠環(huán)加氧酶2(COX-2)ELISA試劑盒，英文名：COX-2 ELISA Kit

小鼠環(huán)孢素A(CsA)ELISA試劑盒，英文名：CsA ELISA Kit

小鼠花生四烯酸5脂氧合酶(Alox5)ELISA試劑盒，英文名：Alox5 ELISA Kit

小鼠花生四烯酸(AA)ELISA試劑盒，英文名：AA ELISA Kit

小鼠紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)ELISA試劑盒，英文名：EPOR ELISA Kit

小鼠紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA試劑盒，英文名：EPO ELISA Kit

小鼠橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白α(sm Actinin-α)ELISA試劑盒，英文名：sm Actinin-α ELISA Kit

小鼠黑色素細(xì)胞抗體(MC Ab)ELISA試劑盒，英文名：MC Ab ELISA Kit

親和層析柱1 mL小鼠黑色素瘤(Melanoma)ELISA試劑盒，英文名：Melanoma ELISA Kit

小鼠核轉(zhuǎn)錄因子kBP65(NFkBP65)ELISA試劑盒，英文名：NFkBP65 ELISA Kit

小鼠核轉(zhuǎn)錄因子1(AP－1)ELISA試劑盒，英文名：AP－1 ELISA Kit

小鼠核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)ELISA試劑盒，英文名：NF-κB p65 ELISA Kit

小鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)ELISA試劑盒，英文名：NF-κB p65 ELISA Kit

小鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒，英文名：RANKL ELISA Kit

小鼠核因子κB受體活化劑配體(RANKL)ELISA試劑盒，英文名：RANKL ELISA Kit

小鼠核因子κB(NF-κB)ELISA試劑盒，英文名：NF-κB ELISA Kit

小鼠核因子κB(NF-Kb)ELISA試劑盒，英文名：NF-Kb ELISA Kit

小鼠核因子E2相關(guān)因子2(Nrf2)ELISA試劑盒，英文名：Nrf2 ELISA Kit

小鼠含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪氨酸激酶2(Tie-2)ELISA試劑盒，英文名：Tie-2 ELISA Kit

小鼠含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪氨酸激酶1(Tie-1)ELISA試劑盒，英文名：Tie-1 ELISA Kit

小鼠還原型谷胱甘肽(GSH)ELISA試劑盒，英文名：GSH ELISA Kit

小鼠過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物酶(LPO)ELISA試劑盒，英文名：LPO ELISA Kit

小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISA試劑盒，英文名：PPAR-γ ELISA Kit

小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體β(PPAR-β)ELISA試劑盒，英文名：PPAR-β ELISA Kit

小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA試劑盒，英文名：PPAR-α ELISA Kit

小鼠過氧化氫酶(CAT)ELISA試劑盒，英文名：CAT ELISA Kit

小鼠過敏毒素/補(bǔ)體片斷4a(C4a)ELISA試劑盒，英文名：C4a ELISA Kit

小鼠果糖胺(FRA)ELISA試劑盒，英文名：FRA ELISA Kit

小鼠胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒，英文名：Cys-C ELISA Kit

小鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA試劑盒，英文名：Casp-9 ELISA Kit

小鼠胱天蛋白酶7(Casp-7)ELISA試劑盒，英文名：Casp-7 ELISA Kit

小鼠胱天蛋白酶5(CASP-5)ELISA試劑盒，英文名：CASP-5 ELISA Kit

小鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA試劑盒，英文名：Casp-3 ELISA Kit

小鼠胱天蛋白酶10(CASP-10)ELISA試劑盒，英文名：CASP-10 ELISA Kit

小鼠骨粘連蛋白(ON)ELISA試劑盒，英文名：ON ELISA Kit

小鼠骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA試劑盒，英文名：BMP-6 ELISA Kit

小鼠骨形成蛋白(BMPs)ELISA試劑盒，英文名：BMPs ELISA Kit

小鼠骨涎蛋白(BSP)ELISA試劑盒，英文名：BSP ELISA Kit

小鼠骨退化特異標(biāo)志物(CTX-2)ELISA試劑盒，英文名：CTX-2 ELISA Kit

小鼠骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)ELISA試劑盒，英文名：ALP-B ELISA Kit

小鼠骨特性堿性磷酸酶(BALP)ELISA試劑盒，英文名：BALP ELISA Kit

小鼠骨橋素(OPN)ELISA試劑盒，英文名：OPN ELISA Kit

小鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒，英文名：Cr ELISA Kit

親和層析柱等培養(yǎng)基產(chǎn)品母液的配置注意事項(xiàng)

1.打開無菌工作臺及凈化室的紫外燈，消毒半小時(shí)以上。

2.進(jìn)入凈化室前先關(guān)閉紫外燈，打開超凈臺風(fēng)機(jī)，等待30min以上，以排盡臭氧。

3.穿好隔離衣，戴好口罩，帽子。

4.風(fēng)淋2分鐘。

5.0.1%過氧乙酸水泡手，擦干。

6.點(diǎn)燃酒精燈;超凈臺內(nèi)應(yīng)避免放入過多的物品;使用的吸管，滴管，試管，培養(yǎng)瓶等均事先滅菌。

7.打開各類瓶蓋前先過火，以固定灰塵;打開的瓶口、試管口過火焰，鑷子使用前應(yīng)經(jīng)火焰燒灼。

8.水平式風(fēng)機(jī)的超凈臺，應(yīng)使瓶口斜置，應(yīng)盡量避免瓶口敞開直立。

9.同一根吸管或滴管不應(yīng)連續(xù)用于幾個(gè)不同的細(xì)胞系;吸取培養(yǎng)基的吸管應(yīng)離開培養(yǎng)瓶或試管口0.5cm，避免伸入培養(yǎng)瓶口或試管口;以防止細(xì)胞系的互相混雜污染。

10.漏在培養(yǎng)瓶上或臺上的液體，立即用酒精棉球擦凈。

11.操作完畢后恢復(fù)工作臺面。

親和層析柱等細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)用品種類齊全，質(zhì)量可靠。春季促銷，更多試劑優(yōu)惠熱銷產(chǎn)品如下:

XY-(SJ)-00801doxorubicin hydrochloride鹽酸阿霉素CAS：25316-40-9規(guī)格:25mg

XY-(SJ)-00802Doxycycline hyclate  鹽酸強(qiáng)力霉素CAS：規(guī)格:5g 

XY-(SJ)-00803Lincomycin hydrochloride 鹽酸林可霉素 CAS：859-18-7規(guī)格:25g

XY-(SJ)-00804Kinetin   激動(dòng)素CAS：525-79-1規(guī)格:250mg

XY-(SJ)-00805Paclobutrazol多效唑CAS：76738-62-0規(guī)格:100g

XY-(SJ)-00806Lactulose乳果糖CAS：4618-18-2規(guī)格:1g

XY-(SJ)-00807Leupeptin   亮抑酶肽(分裝）CAS：103476-89-7規(guī)格:2mg

XY-(SJ)-00808Leupeptin   亮抑酶肽(分裝）CAS：規(guī)格:5mg

XY-(SJ)-00809Lipopolysaaah aricles   脂多糖CAS：規(guī)格:10mg

XY-(SJ)-00810Laminarin  昆布多糖CAS：9008-22-4規(guī)格:100mg

XY-(SJ)-00811Lysozyme   溶菌酶CAS：12650-88-3規(guī)格:1g

XY-(SJ)-00812Lysozyme   溶菌酶CAS：規(guī)格:5g

XY-(SJ)-00813L-α-Phosphatidylcholine 卵磷脂CAS：8002-43-5規(guī)格:25g

XY-(SJ)-00814Lecithin from Soybean 卵磷脂（液體）CAS：8002-43-5規(guī)格:25g 

XY-(SJ)-00815Hydrindantin dihydrate 二水還原茚三酮CAS：5950-69-6規(guī)格:5g

XY-(SJ)-00816茚三酮CAS：485-47-2規(guī)格:5g

XY-(SJ)-00817蛋黃卵磷脂CAS：      8002-43-5規(guī)格:10g

XY-(SJ)-00818Levodopa 左旋多巴 CAS：規(guī)格:5g 

XY-(SJ)-00819L-Ornithine L-鳥氨酸CAS：規(guī)格:5g 

XY-(SJ)-00820L-Ornithine HCI L-鳥氨酸鹽酸鹽CAS：1069-31-4規(guī)格:5g

XY-(SJ)-00821L-Malic acid L-蘋果酸CAS：97-67-6規(guī)格:25g

XY-(SJ)-00822DL-Malic acid DL-蘋果酸CAS：規(guī)格:25g

XY-(SJ)-00823DL-Malic acid disodium salt DL-蘋果酸鈉一水合物CAS：207511-06-6規(guī)格:25g

XY-(SJ)-00824L-Glutamine   L-谷氨酰胺CAS：56-85-9規(guī)格:25g

XY-(SJ)-00825L-Glutamine   L-谷氨酰胺CAS：規(guī)格:100g

XY-(SJ)-00826β-Alanine   β-丙氨酸 CAS：規(guī)格:25g  

XY-(SJ)-00827D-Alanine D-丙氨酸  CAS：規(guī)格:25g

XY-(SJ)-00828DL-Alanine DL- 丙氨酸CAS：302-72-7規(guī)格:10G

XY-(SJ)-00829L-Alanine L-丙氨酸CAS：56-41-7規(guī)格:25g

XY-(SJ)-00830L-Alanine L-丙氨酸CAS：56-41-7規(guī)格:25g

XY-(SJ)-00831L-Alanine L-丙氨酸CAS：規(guī)格:100g

XY-(SJ)-00832L-Aspartic acid L-天門冬氨酸CAS：56-84-8規(guī)格:25g

XY-(SJ)-00833L-Asparagine L-天門冬酰胺CAS：5794-13-8規(guī)格:25g

XY-(SJ)-00834L-Proline  L-脯氨酸CAS：147-85-3規(guī)格:25g 

親和層析柱等培養(yǎng)基產(chǎn)品上海心語生物科技公司更專業(yè)!我們擁有專業(yè)生化試劑實(shí)驗(yàn)和銷售經(jīng)驗(yàn)，為專業(yè)的您提供專業(yè)的服務(wù)。品牌代理，質(zhì)量保障，其產(chǎn)品涉及生命科學(xué)的所有領(lǐng)域，包括生化試劑，抗體，elisa試劑盒等等。