產(chǎn)品描述:胰島B細胞是胰島細胞的一種,屬內(nèi)分泌細胞,能分泌胰島素,起調(diào)節(jié)血糖含量的作用。胰島B細胞功能受損,胰島素分泌絕對或相對不足,從而引發(fā)糖尿病。大鼠胰島細胞分離自正常大鼠胰腺組織,胰島細胞與糖尿病的發(fā)生相關(guān),對胰島細胞的研究有利于糖尿病的治療。公司提供的大鼠胰島細胞采用膠原酶消化制備而來。細胞的培養(yǎng)采用公司產(chǎn)品大鼠胰島細胞培養(yǎng)試劑盒(RatIsletPrimaCell™:NormalIsletCellsCatNo.3-7393)來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞(如脂肪細胞、纖維細胞等)的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標準的操作流程下,大鼠胰島細胞可以保持原代細胞的分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、技售后服務(wù)標準。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。

大鼠胰島細胞說明書運輸和保存:
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復(fù)蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.大鼠胰島細胞說明書細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時,應(yīng)將細胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。凍存培養(yǎng)基
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
大鼠胰島細胞說明書培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用 Countess®自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應(yīng)不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C。或者,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

名稱:Anhydrous manganese sulfateCAS號:7785-87-7分子量: MnO4S"
"Sf-21(昆蟲細胞)人胚肺成纖維細胞
酸球菌 Lactococcus lactis釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
苜蓿中華根瘤菌馬杜拉放線菌 Actinomadura Sp.
戊糖桿菌 Lactobacillus pentosusMN-s, 小鼠紋狀體神經(jīng)元
毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum鏈霉菌 Streptomyces sp.
胰凝蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)Annexin V-FITC/PI雙染法細胞凋亡檢測試劑盒
泡盛曲霉 Aspergillus awamori釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
大鼠胰島細胞說明書百脈根根瘤菌 Rhizobium loti大孢綠僵菌=金龜子綠僵菌大孢變種 Metarhizium majarosporae= anisopliae var. majus
P388D1(小鼠淋巴樣瘤細胞)人肝動脈內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基
B-甲吡分子式:英文名稱:B- methyl pyridineCAS號:分子量:
5-乙酰-2-甲吡分子式:135.16316英文名稱:5- acetyl -2-CAS號:36357-38-7分子量: C8H9NO
棗仁皂苷A英文名稱:Jujuboside A分子式:1207.35136分子量:C58H94O26CAS號:55466-04-1
4-溴三氟硼酸鉀分子式:262.9英文名稱:4- Bromophenyl three kbf4CAS號:374564-35-9分子量: C6H4BBrF3K
全氟辛磺酸鉀分子式:538.22英文名稱:Perfluorooctanesulfonic acid potassiumCAS號:2795-39-3分子量: C8F17KO3S
3,5-二甲-1,2,4-三唑分子式:97.12英文名稱:3,5- two -1,2,4- threeCAS號:7343-34-2分子量: C4H7N3
4-三氟甲氧氟分子式:180.1英文名稱:4- three fluorine methoxy fluorobenzeneCAS號:352-67-0分子量: C7H4F4O
巖白菜素英文名稱:Bergeninum分子式:328.27144分子量:C14H16O