我司全程提供細胞生物體、生長特性、組織來源、器官、類型、細胞形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存細胞株說明書信息,我們業(yè)您的細胞系實驗,讓您實驗再無煩擾!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
HFL1 (人胚肺成纖維細胞) | 1×10⁶cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0105 |
商品介紹 :名稱HFL1 (人胚肺成纖維細胞)
別稱HFL-1; HFL 1; Human fetal lung fibroblast 1; HFL
種屬人類
年齡(性別)男性,胎兒
組織來源肺
生長特性貼壁細胞
細胞形態(tài)成纖維細胞樣
生物安全等1
生長培養(yǎng)基Ham's F-12K+10% FBS+1% P/S
推薦傳代比例1:3-1:4
推薦換液頻率2~3次/周
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
注意事項該細胞為有限傳代細胞系,請注意代次控制。
實驗材料: 1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶 2. 100ml滅菌燒杯2個; 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞3、50ml離心筒2個 4、滅菌培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個 5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個 6、細胞計數(shù)板1塊; 7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把; 8、酒精燈1臺;
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程: 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備: 1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。 | 二.細胞處理: 1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入 37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移 入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合 均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液, 加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入 含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液 并檢查細胞密度。2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%, 即可進行傳代培養(yǎng)。對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
凍存培養(yǎng)基:凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用門配制的完全凍存培養(yǎng)基。1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果。 2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。培養(yǎng)細胞凍存方案:以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。注:離心速度和時間取決于細胞種類。5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應(yīng)不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C;蛘,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。人腺苷脫氨酶(ADA)ELISA KitELISA.96T/48T人腺苷脫氨酶(ADA)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人透明質(zhì)酸酶(HAase)ELISA KitELISA.96T/48T人透明質(zhì)酸酶(HAase)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)ELISA KitELISA.96T/48T人天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人酸性磷酸酶(ACP)ELISA KitELISA.96T/48T人酸性磷酸酶(ACP)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人葡萄糖6磷酸異構(gòu)酶(GPI)ELISA KitELISA.96T/48T人葡萄糖6磷酸異構(gòu)酶(GPI)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人磷酸葡萄糖變位酶(PGM)ELISA KitELISA.96T/48T人磷酸葡萄糖變位酶(PGM)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人亮氨酰氨基肽酶(LAP)ELISA KitELISA.96T/48T人亮氨酰氨基肽酶(LAP)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人鏈激酶(SK)ELISA KitELISA.96T/48T人鏈激酶(SK)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人核糖核酸酶(RNASE)ELISA KitELISA.96T/48T人核糖核酸酶(RNASE)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物酶(LPO)ELISA KitELISA.96T/48T人過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物酶(LPO)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
支原體半流培養(yǎng)基 Mycoplasma Semi-fluid Medium 250g
精氨酸支原體肉湯培養(yǎng)基 Arginine Mycoplasma Broth Meium 250g
豬支原體培養(yǎng)基 Pig Mycoplasma Base 250g
支原體瓊脂培養(yǎng)基 Mycoplasma Agar Medium 250g
HFL1 (人胚肺成纖維細胞) 支原體培養(yǎng)基 Mycoplasma Medium 250g
雞支原體培養(yǎng)基基礎(chǔ) 250g
美國藥典培養(yǎng)基(USP標準)
V-J瓊脂培養(yǎng)基(USP) Vogeljohnson Agar Medium 250g
液體大豆酪蛋白消化物培養(yǎng)基 SoybeanCasein Digest Medium 250g
甘露醇鹽瓊脂培養(yǎng)基 MannitolSalt Agar Medium 250g
收到如何處理:
1、先,觀察培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸。、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。
關(guān)鍵詞:
HFL1 (人胚肺成纖維細胞)
上海谷研實業(yè)有限公司主要從事免疫學、分子生物學和常規(guī)生化試劑的銷售,主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細胞株、原代細胞、細胞培養(yǎng)基、標準溶液產(chǎn)品。銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司產(chǎn)品。
公司客戶遍布大學、研究所、醫(yī)院、衛(wèi)生、商品檢驗檢疫、制藥公司、生物技術(shù)公司和食品工業(yè)等單位。
公司主推品牌: (進口、國產(chǎn)) Amresco 、Sigma、 Peprotech 、Corning 、BD Faclon 、Axygen、 Invitrogen、 Qiagen、 Hyclone 、Uscnlife、 Wako 、SantaCruz、sciencell、Gibco、R&D、Linco、Amersham、Millipore。