凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應(yīng)不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C;蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
我司全程提供細胞生物體、生長特性、組織來源、器官、類型、細胞形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存細胞株說明書信息,我們業(yè)您的細胞系實驗,讓您實驗再無煩擾!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
Hep 3B2.1-7 (人肝癌細胞) | 1×10⁶cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0101 |
商品介紹 :
名稱Hep 3B2.1-7 (人肝癌細胞)
別稱Hep 3B2_1-7; Hep 3B2; HEP-3B2; HEP3B2; Hep-3B; HEP-3B; Hep 3B; Hep3B; HEP3B
種屬人類
年齡(性別)男性,8歲
組織來源肝細胞癌,肝
生長特性貼壁細胞
細胞形態(tài)上皮細胞樣
背景描述Hep 3B2.1-7細胞是來自8歲男性黑人的組織。Hep 3B2.1-7細胞的染色體模式數(shù)目為60,在裸鼠中能致瘤。Hep 3B2.1-7細胞整合了完整的乙型肝炎病毒基因組,需在2生物安全防護下操作。
生物安全等2
生長培養(yǎng)基MEM+10% FBS+1% P/S
推薦傳代比例1:2-1:3
推薦換液頻率2~3次/周
倍增時間~40-50小時
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
致瘤性Yes, in nude mice.
基因表達情況alpha ferotein (alpha-ferotein); hepatitis B surface antigen (HBsAg); albumin; alpha2 macroglobulin (alpha-2-macroglobulin); alpha1 antitrypsin (alpha-1-antitrypsin); transferrin;, alpha1 antichymotrypsin (alpha-1-antichymotrypsin); haptoglobin; ceruloplasmin; plasminogen; complement (C3, C4); C3 activator; fibrinogen; alpha1 acid glycoprotein (alpha-1 acid glycoprotein);, alpha2 HS glycoprotein (alpha-2-HS-glycoprotein); beta lipoprotein (beta-lipoprotein); retinol binding protein (retinol-
實驗材料: 1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶 2. 100ml滅菌燒杯2個; 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞3、50ml離心筒2個 4、滅菌培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個 5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個 6、細胞計數(shù)板1塊; 7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把; 8、酒精燈1臺;
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程: 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備: 1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。 | 二.細胞處理: 1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入 37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移 入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合 均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液, 加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入 含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液 并檢查細胞密度。2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%, 即可進行傳代培養(yǎng)。對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
收到如何處理:1、先,觀察培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸。⒓毎螒B(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。4、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。人脾臟酪氨酸激酶(Syk)ELISA KitELISA.96T/48T人脾臟酪氨酸激酶(Syk)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶(STK)ELISA KitELISA.96T/48T人絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶(STK)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人白介素受體相關(guān)激酶(IRAK)ELISA KitELISA.96T/48T人白介素受體相關(guān)激酶(IRAK)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人尿激酶(UK)ELISA KitELISA.96T/48T人尿激酶(UK)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PCK)ELISA KitELISA.96T/48T人磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PCK)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人胰蛋白酶(trypsin)ELISA KitELISA.96T/48T人胰蛋白酶(trypsin)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人β位淀粉樣體蛋白裂解酶1(BACE1)ELISA kitELISA.96T/48T人β位淀粉樣體蛋白裂解酶1(BACE1)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人蛋白二硫化物異構(gòu)酶體(PDI)ELISA KitELISA.96T/48T人蛋白二硫化物異構(gòu)酶體(PDI)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人蛋白二硫化物異構(gòu)酶A3(PDIA3)ELISA KitELISA.96T/48T人蛋白二硫化物異構(gòu)酶A3(PDIA3)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA KitELISA.96T/48T人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
抗生素檢定培養(yǎng)基
抗生素檢定培養(yǎng)基1號(高pH) Antibiotic Agar NO.1 250g
Hep 3B2.1-7 (人肝癌細胞) 抗生素檢定培養(yǎng)基1號(低pH) AntibioticAgar No.1 250g
抗生素檢定培養(yǎng)基2號(高pH) Antibiotic Agar NO.2 250g
抗生素檢定培養(yǎng)基2號(低pH) Antibiotic Agar NO.2 250g
抗生素檢定培養(yǎng)基3號 Antibiotic Agar NO.3 250g
抗生素檢定培養(yǎng)基4號 Antibiotic Agar NO.4 250g
抗生素檢定培養(yǎng)基7號 Antibiotic Agar NO.7 250g
抗生素檢定培養(yǎng)基8號 Antibiotic Agar NO.8 250g
抗生素5號 Antibiotic NO.5 250g
關(guān)鍵詞:
Hep 3B2.1-7 (人肝癌細胞)
上海谷研實業(yè)有限公司主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的銷售,主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細胞株、原代細胞、細胞培養(yǎng)基、標準溶液產(chǎn)品。銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司產(chǎn)品。
公司客戶遍布大學(xué)、研究所、醫(yī)院、衛(wèi)生、商品檢驗檢疫、制藥公司、生物技術(shù)公司和食品工業(yè)等單位。
公司主推品牌: (進口、國產(chǎn)) Amresco 、Sigma、 Peprotech 、Corning 、BD Faclon 、Axygen、 Invitrogen、 Qiagen、 Hyclone 、Uscnlife、 Wako 、SantaCruz、sciencell、Gibco、R&D、Linco、Amersham、Millipore。