產(chǎn)品信息:
產(chǎn)品名稱:Hela (人宮頸癌細胞) 規(guī)格:1×10⁶cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號:GOY-01X0100
分類:細胞系
產(chǎn)品詳細介紹:名稱Hela (人宮頸癌細胞)
別稱HELA; Hela; He La; He-La; Henrietta Lacks cells; Helacyton gartleri
種屬人類
年齡(性別)女性,30歲 6個月
組織來源宮頸腺癌
生長特性貼壁細胞
細胞形態(tài)上皮細胞樣
背景描述Hela細胞是一個來自人組織和連續(xù)培養(yǎng)維持非整倍體上皮樣細胞系。Hela細胞是由G·D·Gey等在1951年從31歲女性黑人的宮頸癌建立。經(jīng)原始組織切片樣品的重新觀察,Jones等將其診斷為腺癌。已知該細胞系含有人乳頭狀瘤病毒18序列,需在2生物安全防護臺操作。Hela細胞角蛋白陽性,p53表達量較低,但表達正常水平的Prb(視網(wǎng)膜母細胞瘤抑制因子)。
生物安全等2
生長培養(yǎng)基MEM+10% FBS+1% P/S
推薦傳代比例1:2-1:4
推薦換液頻率2~3次/周
倍增時間~32-48小時
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
基因表達情況Lysophosphatidylcholine (lyso-PC) induces AP-1 activity and c-jun N-terminal kinase activity (JNK1) by a protein kinase C-independent pathway. The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining.
實驗要點及說明:1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告: 一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織完全被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作步驟:1、貼壁細胞的消化①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的 完全細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除胰酶細胞消化液后,加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。人磷酯酰肌醇特異性磷酯酶C(PIPLC)ELISA KitELISA.96T/48T人磷酯酰肌醇特異性磷酯酶C(PIPLC)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人磷酯酶C(PLC)ELISA KitELISA.96T/48T人磷酯酶C(PLC)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人酪氨酸激酶2(Tyk-2)ELISA KitELISA.96T/48T人酪氨酸激酶2(Tyk-2)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人白介素1β轉(zhuǎn)換酶(ICE)ELISA KitELISA.96T/48T人白介素1β轉(zhuǎn)換酶(ICE)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人整合素連接激酶1(ILK-1)ELISA KitELISA.96T/48T人整合素連接激酶1(ILK-1)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人細胞色素P450c21B/21-羥化酶(CYP21B)ELISA KitELISA.96T/48T人細胞色素P450c21B/21-羥化酶(CYP21B)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人細胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)ELISA KitELISA.96T/48T人細胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)ELISA KitELISA.96T/48T人末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)ELISA KitELISA.96T/48T人吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人絲氨酸蛋白酶(PRSS)ELISA KitELISA.96T/48T人絲氨酸蛋白酶(PRSS)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
Hela (人宮頸癌細胞) 木糖賴氨酸脫氧膽酸鹽瓊脂培養(yǎng)基(2015藥典) 250g
腸道菌增菌液體培養(yǎng)基(顆粒)(2015藥典) 250g
RV沙門菌增菌液體培養(yǎng)基(2015藥典)(顆粒) 250g
抑菌劑效力檢查培養(yǎng)基
沙氏葡萄糖瓊脂顆粒(2015藥典) 250g
沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基(2015藥典)(顆粒) 250g
青霉素酶制備培養(yǎng)基
青霉素酶制備培養(yǎng)基 Penicillinase Preparation Medium 250g
含青霉素酶TSA培養(yǎng)基平板 7cm/個*10
含青霉素酶接觸皿培養(yǎng)基平板 6.5cm*10個/包
關(guān)鍵詞:
Hela (人宮頸癌細胞)
上海谷研實業(yè)有限公司主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的銷售,主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細胞株、原代細胞、細胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司產(chǎn)品。
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