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產(chǎn)品屬性本產(chǎn)品采購屬于商業(yè)貿(mào)易行為

GNM (人口腔鱗癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌細胞)

  • 市場價格: 電議
  • 產(chǎn)品型號:
  • 更新時間: 2025/6/13 16:03:18
  • 生產(chǎn)地: 中國大陸
  • 訪問次數(shù): 517次
  • 公司名稱: 上海谷研實業(yè)有限公司

企業(yè)檔案

上海谷研實業(yè)有限公司

9 營業(yè)執(zhí)照已上傳

企業(yè)類型:經(jīng)銷商

公司地址:嘉定區(qū)澄瀏公路52號盛創(chuàng)企業(yè)

主營產(chǎn)品:從事生物科技、醫(yī)藥科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)咨詢、技術(shù)服務(wù)、技術(shù)開發(fā)、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、商務(wù)咨詢(除經(jīng)紀),電子商務(wù)(不得從事增值電信、金融業(yè)務(wù)),投資管理,建設(shè)工程(憑許可資質(zhì)經(jīng)營),化工原料及產(chǎn)品(除危險化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、、民用爆炸物品、易制毒化學(xué)品)、實驗室設(shè)備、測量器材、酒店設(shè)備、環(huán)保設(shè)備、鐘表、服裝鞋帽、皮具箱包、一類醫(yī)療器械、電子產(chǎn)品、趵陶瓷制品的銷售

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產(chǎn)品簡介

GNM (人口腔鱗癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌細胞)公司現(xiàn)貨出售的商品: 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 6 0.156-10 ng/mL 人解整合素樣金屬蛋白酶12(ADAM 12)ELISA試劑盒 0.156-10 ng/mL ELISA Ki

詳細內(nèi)容

詳細內(nèi)容

公司簡介

操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的  完全細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除胰酶細胞消化液后,加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
產(chǎn)品信息:
產(chǎn)品名稱:GNM (人口腔鱗癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌細胞)
規(guī)格:1×10⁶cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號:GOY-01X0086
分類:細胞系
產(chǎn)品詳細介紹:
名稱GNM (人口腔鱗癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌細胞)
生長特性貼壁細胞
細胞形態(tài)上皮細胞樣
生物安全等1
生長培養(yǎng)基RPMI-1640+20% FBS+1% P/S
推薦傳代比例1:2-1:4
推薦換液頻率2~3次/周
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大。
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織完全被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
 

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PALCAM瓊脂 PALCAM Agar 250g
Half–Fraser培養(yǎng)基 Half-Fraser Medium 250g
Fraser培養(yǎng)基 Fraser Medium 250g
GNM (人口腔鱗癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌細胞)PALCAM添加劑1  1ml/支*5
LPM瓊脂 LPM Agar 250g
改良緩沖蛋白胨水(MBP) Modified Buffered Peptone Water 250g
Fraser(FB2)添加劑 Fraser Supplement 5ml*2
UVM培養(yǎng)基 UVM Medium 250g
UVM1添加劑 UVM Supplement1 1ml*5支
FB2添加劑 FB2 Supplement 2ml*20支

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