收到如何處理:
1、先,觀察培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如貼壁特性(貼壁/懸。、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)基,預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內,1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。
我司全程提供細胞生物體、生長特性、組織來源、器官、類型、細胞形態(tài)、培養(yǎng)條件、應用、組織、凍存條件等復蘇及凍存細胞株說明書信息,我們業(yè)您的細胞系實驗,讓您實驗再無煩擾!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
GBC-SD (人膽囊癌細胞) | 1×10⁶cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0085 |
商品介紹 :
名稱GBC-SD (人膽囊癌細胞)
別稱GBCSD
種屬人類
年齡(性別)男性,61歲
組織來源膽囊癌
生長特性貼壁細胞
細胞形態(tài)上皮細胞樣
背景描述GBC-SD細胞是由王展明等人在2000年從一位61歲的男性低分化膽囊癌患者中建立的;GBC-SD細胞的形狀有多邊形、紡錘形和正方形;GBC-SD細胞能分泌CEA和CA19-9。GBC-SD細胞倍增時間大約為21.4小時,可移植到裸鼠,生成的腫瘤與原發(fā)腫瘤相似。
生物安全等1
生長培養(yǎng)基RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
推薦傳代比例1:2-1:4
推薦換液頻率2~3次/周
凍存條件
凍存液:55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
致瘤性Yes, in nude mice.
實驗材料: 1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶 2. 100ml滅菌燒杯2個; 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞3、50ml離心筒2個 4、滅菌培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個 5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個 6、細胞計數(shù)板1塊; 7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把; 8、酒精燈1臺;
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程: 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備: 1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。 | 二.細胞處理: 1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入 37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移 入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合 均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液, 加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入 含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液 并檢查細胞密度。2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%, 即可進行傳代培養(yǎng)。對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
凍存培養(yǎng)基:凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用門配制的完全凍存培養(yǎng)基。1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。 2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。培養(yǎng)細胞凍存方案:以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。注:離心速度和時間取決于細胞種類。5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調整至該細胞適合的活細胞密度。6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C;蛘,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。人谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)ELISA KitELISA.96T/48T人谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人谷胱甘肽(GSH)ELISA KitELISA.96T/48T人谷胱甘肽(GSH)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人17-酮類固醇(17-KS)ELISA KitELISA.96T/48T人17-酮類固醇(17-KS)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人17羥皮質類固醇(17-OHCS)ELISA KitELISA.96T/48T人17羥皮質類固醇(17-OHCS)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
中文名稱方法規(guī)格中文名稱方法規(guī)格
人組織蛋白酶K(cath-K)ELISA KitELISA.96T/48T人組織蛋白酶K(cath-K)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人骨形成蛋白(BMPs)ELISA KitELISA.96T/48T人骨形成蛋白(BMPs)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人視黃醇結合蛋白4(RBP-4)ELISA KitELISA.96T/48T人視黃醇結合蛋白4(RBP-4)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人蛋白脂質蛋白抗體(PLP)ELISA KitELISA.96T/48T人蛋白脂質蛋白抗體(PLP)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人垂草扁桃酸(VMA) ELISA KitELISA.96T/48T人垂草扁桃酸(VMA) ELISA Kit ELISA. 96T/48T
李氏菌選擇性培養(yǎng)基基礎(MMA) Modified Mcbride Agar Base 250g
GBC-SD (人膽囊癌細胞) 復達欣 Fortum 3mg/支*5
糖發(fā)酵基礎肉湯 Bromcresol Purple Broth Base 250g
李氏菌增菌肉湯(LB1,LB2)基礎 Listeria Enrichment Broth Base 250g
萘啶酮酸(4.0mg) Nalidixic Acid 4.0mg*5
吖啶黃素(5.0mg) Acridine flavin 5mg*5
七葉苷培養(yǎng)基 Esculin Medium 10
牛津瓊脂(OXA)基礎 Oxford Agar Base 250g
緩沖李氏菌增菌肉湯基礎(BLEB) Buffered Listeria Enrichment Broth 250g
關鍵詞:
GBC-SD (人膽囊癌細胞)
上海谷研實業(yè)有限公司主要從事免疫學、分子生物學和常規(guī)生化試劑的銷售,主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細胞株、原代細胞、細胞培養(yǎng)基、標準溶液產(chǎn)品。銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司產(chǎn)品。
公司客戶遍布大學、研究所、醫(yī)院、衛(wèi)生、商品檢驗檢疫、制藥公司、生物技術公司和食品工業(yè)等單位。
公司主推品牌: (進口、國產(chǎn)) Amresco 、Sigma、 Peprotech 、Corning 、BD Faclon 、Axygen、 Invitrogen、 Qiagen、 Hyclone 、Uscnlife、 Wako 、SantaCruz、sciencell、Gibco、R&D、Linco、Amersham、Millipore。